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合作信息
合作標(biāo)題：檢測(cè)禽流感新城疫膠體金試紙盒
合作內(nèi)容：禽病膠體金快速診斷產(chǎn)品說(shuō)明

一．膠體金應(yīng)用背景
隨著世界范圍內(nèi)畜禽業(yè)的養(yǎng)殖規(guī)模不斷擴(kuò)大，動(dòng)物傳染病危害隨之加劇。有效防治疾病的關(guān)鍵是快速準(zhǔn)確地診斷致病原，及時(shí)采取有效的預(yù)后措施。因此畜禽養(yǎng)殖業(yè)亟需適宜的快速診斷試劑。我國(guó)畜禽疾病防治采取以疫苗免疫為主的綜合措施，但實(shí)際生產(chǎn)中常出現(xiàn)免疫失敗，導(dǎo)致疫病流行。因此，快速準(zhǔn)確地檢測(cè)畜禽的免疫抗體水平在疾病防治中就顯得越發(fā)重要了。
    隨著生物技術(shù)的進(jìn)步，國(guó)內(nèi)外獸醫(yī)專家研究開發(fā)了多種檢測(cè)方法，如ELISA、Dot-ELISA、間接血凝法、病毒分離、RT-PCR、免疫熒光等方法。但是這些方法需要設(shè)備比較齊全的實(shí)驗(yàn)室及較高水平的專業(yè)人員操作。檢測(cè)過(guò)程繁雜，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)，檢測(cè)成本也偏高。在國(guó)家財(cái)政支持下，這些方法正普及到國(guó)內(nèi)地區(qū)市級(jí)獸醫(yī)站等單位，而那些缺少儀器設(shè)備和專門技術(shù)人員的基層獸醫(yī)站及畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)，更需要快速準(zhǔn)確的現(xiàn)場(chǎng)診斷試劑，膠體金試紙就是最能滿足用戶需要的產(chǎn)品。

二、膠體金試紙?zhí)攸c(diǎn)
⒈加樣簡(jiǎn)單，操作簡(jiǎn)便，非專業(yè)人士經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單培訓(xùn)即可操作；
⒉特異性強(qiáng)、具備ELISA試劑同樣的抗體抗原材料及反應(yīng)原理，敏感性可達(dá)到ELISA水平．如果結(jié)合銀染色能有更高的敏感性；
⒊單份樣品即可檢測(cè)，試劑和樣品用量極小，可以低至1～2μL。特別適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)，無(wú)需熒光顯微鏡和酶標(biāo)檢測(cè)儀等儀器，非常適合現(xiàn)場(chǎng)使用；
⒋檢測(cè)時(shí)間大大縮短，試紙反應(yīng)迅速，樣品加入后，一般5～10分鐘內(nèi)即可判讀結(jié)果；
⒌穩(wěn)定性好，試紙產(chǎn)品是干法試劑，常溫保存即可。沒(méi)有有害物質(zhì)(如放射性同位素、鄰苯二胺等)的參與；
⒍多聯(lián)診斷試紙，即在同一條膜上可以同時(shí)檢測(cè)多種抗原（抗體），大大提高了檢測(cè)效率，同時(shí)也降低了檢測(cè)成本。
⒎膠體金快速檢測(cè)試紙可在現(xiàn)場(chǎng)操作，容易被消費(fèi)者及監(jiān)督、檢驗(yàn)部門所接受，能取得較大的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。

三、研究所簡(jiǎn)介
本所由世界禽病學(xué)會(huì)會(huì)員、韓國(guó)RapiGen生命科學(xué)研究所（特聘外籍）研究員劉會(huì)芳先生與多位長(zhǎng)期工作在生產(chǎn)和科研第一線的中青年專家創(chuàng)辦，以河北省農(nóng)科院、河北農(nóng)業(yè)大學(xué)、河北科技師范學(xué)院等科研院所為依托，與韓國(guó)RapiGen生命科學(xué)研究所緊密合作，利用當(dāng)今國(guó)際新技術(shù)與雙方共同研發(fā)的高新產(chǎn)品服務(wù)于我國(guó)畜牧事業(yè)，為養(yǎng)殖業(yè)保駕護(hù)航。研究所主要工作如下：
利用單克隆抗體（德國(guó)Koehler、丹麥Jerne和阿根廷Milstein獲84年諾貝爾獎(jiǎng)）、膠體金標(biāo)技術(shù)（美國(guó)Faulk和Taylor已多次獲諾貝爾獎(jiǎng)提名）、免疫色譜學(xué)等理論。研發(fā)成功畜禽用膠體金快速診斷試紙盒。家禽主要是新城疫、禽流感并能將流感分型。其一條試紙能測(cè)多個(gè)病毒為世界首創(chuàng)。目前正根據(jù)我國(guó)豬病診斷的迫切需要加緊研發(fā)豬瘟、藍(lán)耳病、圓環(huán)病毒等病毒的快速診斷試紙。另外相關(guān)病毒的抗體測(cè)定試紙盒已有部分研發(fā)成功，正在進(jìn)行最后的測(cè)定工作。
針對(duì)家禽大腸桿菌病頑固、沙門氏菌病（雞白痢傷寒）漫延、里氏桿菌（鴨漿膜炎）猖獗的情況，研究所開發(fā)成功了新的自家疫苗制造方法。新方法根除了新的疫苗副作用大的缺點(diǎn)，其內(nèi)毒素含量?jī)H為以前疫苗的幾十分之一。新疫苗在能引起家禽體液免疫的同時(shí)，還能引起細(xì)胞免疫，為解決家禽業(yè)的老大難問(wèn)題找到了新的方法。其技術(shù)為世界領(lǐng)先。
從事新型聚合酶擴(kuò)增技術(shù)（美國(guó)Kary Mullis因發(fā)明此技術(shù)獲93年諾貝爾獎(jiǎng)）的研發(fā)和應(yīng)用，與韓國(guó)合作正在研發(fā)一次能測(cè)出十到三十個(gè)病的雞、豬、犬等畜禽的高密度和低密度基因芯片。已有部分產(chǎn)品出品。
針對(duì)流行疾病，應(yīng)用、研發(fā)和生產(chǎn)相應(yīng)的化學(xué)藥物。研發(fā)其最佳組合和最新應(yīng)用。
本企業(yè)的膠體金試紙已經(jīng)在市場(chǎng)流通2～3年，效果較好。其產(chǎn)品是與韓國(guó)協(xié)作生產(chǎn)。主要利用的韓國(guó)的金標(biāo)技術(shù)。（注：韓國(guó)的金標(biāo)技術(shù)和試紙生產(chǎn)技術(shù)在全世界名列第一）普通的病毒檢測(cè)工作要7～8天才發(fā)現(xiàn)病毒，但是采用試紙只需要15～20分鐘即可。膠體金的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)目前在中國(guó)沒(méi)有，所有的標(biāo)準(zhǔn)都只有在國(guó)外有，比如本所的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)就是韓國(guó)的，自身只有幾個(gè)檢測(cè)產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)。比如檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)為0.031個(gè)血凝單位為檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，采用活病毒或疫苗進(jìn)行產(chǎn)品檢測(cè)。對(duì)于活病毒的檢測(cè)是稀釋1000～10000倍。現(xiàn)今膠體金的試紙生產(chǎn)主要集中在河南，上海和武漢。但是標(biāo)記技術(shù)都不太成熟，而韓國(guó)的技術(shù)較好，但是其缺乏英文版本，需要掌握韓語(yǔ)的技術(shù)人員。
石家莊市神九畜禽疾病防治及藥物研究所與韓國(guó)瑞捷（RAPIGEN）研究所合作并在世界上首次推出新城疫（NDV）+禽流感（AIVH1～15）、禽流感（AIVH1～15）+禽流感（AIVH5）病毒快速診斷試紙。該項(xiàng)目由國(guó)際上膠體金方面頂尖科學(xué)家樸在九(Jae-Ku Park)醫(yī)學(xué)博士主持，可使雞場(chǎng)提前5～10天探知瘟疫的侵入，在發(fā)病時(shí)能迅速判斷是新城疫還是流感、是流感時(shí)又能分出是否是H5型的，解決了行業(yè)內(nèi)的一大難題，非常適合中國(guó)需要。相關(guān)產(chǎn)品如下：
1、NDV + AIV（H1～15定性）快速診斷試紙
2、AIV（H1～15定性）+ AIV（ H5分型）快速診斷試紙
3、NDV 快速診斷試紙
4、AIV（H1～15定性）快速診斷試紙
5、AIV（ H5分型）快速診斷試紙

四、產(chǎn)品設(shè)計(jì)原理
禽用膠體金快速診斷試紙是利用膠體金原理和免疫層析原理來(lái)實(shí)現(xiàn)捕捉野毒的。
膠體金是俗稱金子的金屬金的水溶膠。膠體金標(biāo)記技術(shù)是以膠體金作為示蹤標(biāo)志物或顯色劑，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種新型免疫標(biāo)記技術(shù)。
免疫層析法 (Immunochromatography)是九十年代興起的一種基于免疫膠體金技術(shù)的快速診斷技術(shù)，其原理是將單克隆抗體與膠體金結(jié)合，置于聚脂膜中；加樣后，如樣品中有病毒，則金標(biāo)抗體與部分病毒結(jié)合在毛細(xì)現(xiàn)象的作用下向上流動(dòng)，遇到固定在硝酸纖維膜上的抗體時(shí)便生成“金標(biāo)抗體/抗原/抗體”夾心免疫復(fù)合物從而聚集顯色（檢測(cè)線陽(yáng)性），另一部分沒(méi)與抗體結(jié)合的金標(biāo)抗體與病毒結(jié)合物和隨液體向上流動(dòng)，遇抗抗體時(shí)形成“抗抗體/金標(biāo)抗體/抗原”復(fù)合物顯色（質(zhì)控線）；當(dāng)樣本中不含病毒時(shí)，則不形成“金標(biāo)抗體/抗原/抗體”夾心免疫復(fù)合物不顯色（檢測(cè)線陰性），但抗抗體與金標(biāo)抗體復(fù)合物仍顯色（質(zhì)控線），從而實(shí)現(xiàn)特異性的免疫診斷。該技術(shù)與以往常規(guī)診斷方法相比具有以下突出優(yōu)點(diǎn)
•  快速：全部檢測(cè)過(guò)程僅需 5～30分鐘。
•  準(zhǔn)確：比酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA其設(shè)備5萬(wàn)元）準(zhǔn)確度高，與聚合酶擴(kuò)增技術(shù)（PCR其設(shè)備百萬(wàn)元）相近。
•  簡(jiǎn)便：不需其它任何儀器設(shè)備，操作也極其簡(jiǎn)單，可隨時(shí)隨地進(jìn)行,也不需要專業(yè)臨檢人員操作，而且攜帶方便，基層可以開展。
•  穩(wěn)定性好：金標(biāo)試劑穩(wěn)定，2~30℃可長(zhǎng)期保存。
•  檢測(cè)標(biāo)本種類多：泄殖腔內(nèi)容物、糞便、氣管粘液等。

五、 產(chǎn)品模式圖        
 
圖二 rapid test 模式圖
 
圖三 結(jié)構(gòu)圖：                                                        
 
反應(yīng)模式圖：(以人的HCG為例)
 

六、產(chǎn)品參數(shù)及使用

1、禽流感病毒（AIV）+新城疫病毒（NDV）聯(lián)合抗原檢測(cè)試紙
•檢測(cè)：所有禽流感含H1~15所有亞型和新城疫病毒（包含大量變異株）。
•檢測(cè) 發(fā)布時(shí)間：2009/3/2 11:47:00
聯(lián)系方式
單位名稱： 魏晗
聯(lián)系電話： 0311-86800209
傳    真：
聯(lián)系手機(jī)： 15803214536
聯(lián) 系 人： 劉軍同
網(wǎng)    址： http://
聯(lián) 系 QQ： 359547702
電子郵箱： liujuntong268@163.com
郵    編： 058000
地    址： 河北石家莊和平西路598號(hào)
 
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