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備 注: 精品供應(yīng)生物制品凍干粉,水針,雞疫苗,豬疫苗
全國招商供應(yīng):法氏囊五肽(獸用)
聯(lián)系人:朱經(jīng)理
電話:15852303608
江蘇南京
供應(yīng):血凝素PHA
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法氏囊五肽(Bursopentin ,BP5)作用機(jī)制
免疫系統(tǒng)的基本功能是保護(hù)機(jī)體免于疾病的侵害。這些疾病不僅包括由于細(xì)菌、病毒及其他病原體引起的疾病,同時(shí)也包括癌癥以及由于免疫失調(diào)自身免疫紊亂導(dǎo)致的疾病。免疫系統(tǒng)包括參與免疫應(yīng)答的各種器官、組織細(xì)胞和免疫效應(yīng)分子。胸腺和法氏囊是中樞免疫器官。胸腺不僅是T細(xì)胞分化、發(fā)育和成熟的場所,而且還可以分泌多種胸腺激素、調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能,特別是細(xì)胞免疫功能。胸腺激素在疾病診斷和治療中有重要的作用,現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于治療乙肝、丙肝、腫瘤、癌癥和免疫缺陷等的研究中,是一類免疫增強(qiáng)劑或免疫調(diào)節(jié)劑。與胸腺具有相同地位的法氏囊是禽類的特有免疫器官,是B細(xì)胞發(fā)育分化和成熟的場所,法氏囊除具有中樞免疫器官的地位外,還作為外周免疫器官發(fā)揮作用。近年來通過對法氏囊免疫活性因子的研究發(fā)現(xiàn),法氏囊中存在著對機(jī)體免疫功能具有重要調(diào)節(jié)作用的免疫活性因子。其中,囊素三肽是已知的法氏囊活性因子,但由于其功能的局限性限制了其應(yīng)用。法氏囊五肽是由南京農(nóng)業(yè)大學(xué)、南京大學(xué)、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院、上海農(nóng)業(yè)科學(xué)院的有關(guān)科研人員經(jīng)過多年的潛心研究而發(fā)現(xiàn)的一種新的具有免疫調(diào)節(jié)功能和抗機(jī)體過氧化應(yīng)激功能的活性肽,并已獲得國家發(fā)明專利。法氏囊五肽(BP5)可以促進(jìn)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的增殖、提高機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫的水平、還可以提高機(jī)體抗過氧化應(yīng)激的能力,可以制成具有廣泛應(yīng)用前景的免疫調(diào)節(jié)、免疫治療和抗過氧化作用的藥物或制劑。
囊素五肽(BP5)的免疫調(diào)節(jié)活性
囊素五肽具有增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的增殖的能力。囊素五肽不但具有提高機(jī)體體液免疫的功能而且還能提高機(jī)體的細(xì)胞免疫功能,并且具有平衡Th1和Th2類型免疫反應(yīng)的功能。而囊素五肽的免疫平衡作用是一般免疫增強(qiáng)劑所不具備的。
1)囊素五肽具有提高血凝抗體滴度的能力
2)囊素五肽能夠提高特異性抗體(IgG)的分泌水平且具有平衡抗體亞型(IgG1和IgG2a)分泌水平的能力
3)囊素五肽能夠提高細(xì)胞因子的分泌水平
囊素五肽不但能提高代表Th1類型免疫反應(yīng)的細(xì)胞因子IL-2 和IFN-γ的水平,同時(shí)能顯著提高代表Th2類型的細(xì)胞因子IL-4 和 IL-10的水平。
4)囊素五肽能夠顯著提高脾臟T淋巴細(xì)胞CD3+CD4+和CD3+CD8+的百分率
5)囊素五肽能夠提高特異性CTL對靶細(xì)胞的殺傷活性
囊素五肽的抗過氧化應(yīng)激的活性
1)囊素五肽具有較強(qiáng)的還原能力,具有中和自由基的能力
2)囊素五肽具有抗脂質(zhì)體過氧化的能力
3)囊素五肽能夠有效地清除超氧陰離子
4)囊素五肽能夠有效地清除羥基自由基
囊素五肽(BP5)的應(yīng)用
①與疫苗配合應(yīng)用時(shí),能增強(qiáng)機(jī)體對疫苗的免疫應(yīng)答反應(yīng),使保護(hù)性免疫水平提前出現(xiàn),維持時(shí)間延長,抗體滴度明顯提高。同時(shí)能有效地減輕免疫應(yīng)激給機(jī)體帶來的不利影響。
②能緩解或解除免疫抑制或免疫耐受狀態(tài),提高機(jī)體細(xì)胞免疫水平,消除免疫抑制和免疫耐受對疫苗免疫的不良影響。
③在對病毒性、細(xì)菌性疾病治療時(shí),單獨(dú)或與抗毒殺菌藥物配合使用,可激活機(jī)體自身免疫系統(tǒng)和淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)干擾素及白細(xì)胞介素等細(xì)胞因子的產(chǎn)生,增強(qiáng)藥物對病毒、細(xì)菌等病原體的殺滅能力。
實(shí)施例2 囊素五肽(Bp5)的免疫調(diào)節(jié)活性
天然的囊素五肽具有增強(qiáng)有絲分裂原誘導(dǎo)的鼠脾臟T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的增殖的能力。在此基礎(chǔ)之上,發(fā)明人以4-6周齡小鼠為動(dòng)物模型,以H9亞型禽流感病毒為抗原與不同濃度的囊素五肽混合免疫,分別于0、14、28天共免疫三次,分析了囊素五肽的免疫調(diào)節(jié)功能(見附表1)。通過下列實(shí)驗(yàn)可以發(fā)現(xiàn)囊素五肽不但能提高機(jī)體體液免疫的功能而且還能提高機(jī)體的細(xì)胞免疫功能,并且具有平衡Th1和Th2類型免疫反應(yīng)的功能。
效應(yīng)細(xì)胞制備
第三次免疫后1周后處死各組小鼠,在超凈臺內(nèi)無菌操作取出脾臟,制備成單個(gè)脾細(xì)胞懸液,取淋巴細(xì)胞分離液入離心管管底,沿管壁小心加入兩倍體積的脾細(xì)胞懸液,1200 rpm,離心20 min,沿管壁小心吸出界面層細(xì)胞,PBS洗滌3次,RPMI 1640營養(yǎng)液重懸細(xì)胞,計(jì)數(shù)細(xì)胞,使達(dá)到1×107cells/ 5 mL。參照同樣的方法分離未免疫的同品系小鼠脾淋巴細(xì)胞,用100 µL無血清的RPMI 1640營養(yǎng)液重懸細(xì)胞,使?jié)舛冗_(dá)到5×106cells/100 µL。細(xì)胞用H9 亞型禽流感病毒株A /Duck/ Jiangsu/NJ08/05(107PFU)37 ºC感染 2 h,用RPMI 1640營養(yǎng)液洗滌3次,用5ml RPMI 1640營養(yǎng)液重懸細(xì)胞,37 ºC , 5% CO2培養(yǎng)3 h后,3000 rad照射。接下來將5 mL 的免疫的小鼠脾淋巴細(xì)胞和禽流感病毒感染未免疫的同品系小鼠脾淋巴細(xì)胞37 ℃ 5% CO2 培養(yǎng)箱共孵育6 d,然后收集細(xì)胞, 2000 rpm離心10 min。細(xì)胞沉淀用含5% FBS(m/v)的RPMI 1640 懸浮, 調(diào)整細(xì)胞濃度至1×107 cells / mL,即為效應(yīng)細(xì)胞。
靶細(xì)胞的制備
將NIH3T3細(xì)胞培養(yǎng)成致密單層,用JS株H9亞型禽流感病毒(108 PFU)37 ºC感染 2 h,然后收集細(xì)胞, 2 000 rpm 離心10 min。細(xì)胞沉淀用含5% FBS(m/v)的RPMI 1640 懸浮, 調(diào)整細(xì)胞濃度至1×106 cells / mL,即為靶細(xì)胞。
CTL 的檢測
按Cytotoxicity Assay 試劑盒說明書確定靶細(xì)胞的最佳濃度。效應(yīng)細(xì)胞與靶細(xì)胞數(shù)按效靶比100:1 、50:1 兩個(gè)比例均勻混合于100 μL含5%FBS(m/v)的RPMI 1640培養(yǎng)基中,作為試驗(yàn)組。同時(shí)設(shè)立以下對照:效應(yīng)細(xì)胞自發(fā)釋放組、靶細(xì)胞自發(fā)釋放組、靶細(xì)胞最大釋放組、培養(yǎng)液對照以及體積校正對照組,各組均設(shè)4 個(gè)重復(fù)孔,每孔總體積100 μL 。4 h 后,于570 nm波長下測定OD值。按照下列公式計(jì)算特異性細(xì)胞毒性T 細(xì)胞的百分率: CTL (%) = ( 試驗(yàn)孔OD值-效應(yīng)細(xì)胞自發(fā)釋放OD值-靶細(xì)胞自發(fā)釋放OD值) / (靶細(xì)胞最大釋放OD值-靶細(xì)胞自發(fā)釋放OD值)。
法氏囊五肽的簡易鑒別檢測方法
方法 一 :
根據(jù)法氏囊五肽活性基團(tuán)與檢測試劑A (無色透明溶液)反應(yīng)生成黃色物質(zhì)進(jìn)行檢測。
將2-3毫升純凈水加入法氏囊五肽凍干品后,溶液呈透明無色。取此一定體積的法氏囊五肽溶液(0.1
發(fā)布時(shí)間:
2010/1/23 17:50:00
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